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Dec 09, 2023

Trockene Abstrichtupfer können SARS verursachen

Datum: 1. MAI 2021 // Quelle: Clinical Laboratory News Die Verwendung „trockener Abstriche“ kann die Sammlung von SARS-CoV-2-Proben vereinfachen, flüssige Transportmedien überflüssig machen und Sicherheitsrisiken bei gleichzeitiger Konservierung mindern

Datum:1. MAI 2021 //Quelle:Klinische Labornachrichten

Die Verwendung von „trockenen Abstrichtupfern“ kann laut Forschern die SARS-CoV-2-Probenentnahme vereinfachen, flüssige Transportmedien überflüssig machen und Sicherheitsrisiken mindern und gleichzeitig die Genauigkeit der Tests bewahren (J Appl Lab Med 25. Februar 2021;doi:10.1093/jalm/jfab010)

Prozesse im Zusammenhang mit der Verwendung von Universal Transport Media (UTM) oder viralen Transportmedien (VTM), die bei SARS-CoV-2-Tests verwendet werden, stellen ein Risiko für die biologische Sicherheit dar, da sie Aerosole und infektiöse Abfälle erzeugen können. Trockentupfer könnten eine Alternative darstellen, da sie den Transport von Probenentnahmetupfern in einem Röhrchen ohne flüssige Transportmedien ermöglichen. Nach Erhalt hydratisiert das Labor sie zur Analyse in Transportmedien. Dieser Prozess verbannt Aerosole in eine biologische Sicherheitswerkbank, macht die Verteilung von Aliquots des Sammelmediums an der Sammelstelle überflüssig und macht möglicherweise auch die Notwendigkeit einer Kühlung überflüssig.

Um die Verwendung trockener Abstrichtupfer zu testen, verwendeten die Forscher einen Pool SARS-CoV-2-positiver Proben, um geflockte Abstrichtupfer zu beimpfen. Sie platzierten sofort nach der Impfung beflockte Tupfer in UTM und führten Tests durch. In der Zwischenzeit gaben die Forscher 15 Abstrichtupfer in sterile konische 15-ml-Röhrchen und inkubierten sie bei Raumtemperatur – einige einen Tag lang, einige zwei Tage lang und einige sieben Tage lang. Die Forscher wiederholten das Protokoll für lebenswichtige Transportmedien (VTM) und Kochsalzlösung.

Zum Vergleich bereiteten sie außerdem eine Reihe von Abstrichtupfern vor und testeten diese parallel. Allerdings lagerten die Forscher diese Abstriche in den entsprechenden flüssigen Transportmedien UTM, VTM oder Kochsalzlösung und inkubierten sie bei Raumtemperatur. Anschließend testeten sie die Abstriche 1, 2 und 7 Tage nach der Inokulation, und zwar im Doppel. Sie führten alle Tests mit dem SARS-CoV-2-Assay von Roche cobas durch.

Die Ergebnisse der an den Tagen eins, zwei und sieben getesteten trockenen Abstriche lagen innerhalb von zwei Zyklusschwellenwerten (Cts) der durchschnittlichen Ct-Werte für in demselben Medium hydratisierte und am Tag Null getestete Abstrichtupfer. Die Forscher fanden keinen statistischen Unterschied in den Ct-Werten für Abstrichtupfer, die in flüssigen Medien inkubiert wurden, im Vergleich zu solchen, die vor der Hydratation in flüssigen Medien in trockenen Abstrichen bei Raumtemperatur inkubiert wurden.

Die Forscher stellten fest, dass die Stabilität der SARS-CoV-2-Nukleinsäure auf trockenen Abstrichproben eine weitere Untersuchung der neuen Probenentnahme- und Transporttechnik erfordert.

Forscher haben zwei zirkulierende Gruppen von Biomarkern für duktalen Adenokarzinom des Pankreas (PDAC) identifiziert, die zu einer früheren Diagnose einiger potenziell behandelbarer Tumoren führen können (Clin Cancer Res 2021; 18. März: doi: 10.1158/1078-0432.CCR-20-4215).

PDAC ist einer der solidesten tödlichen Tumoren. Die Diagnose wird bei den meisten Patienten erst in einem fortgeschrittenen Stadium gestellt, in dem eine Operation nicht mehr in Frage kommt. Der einzige derzeit nützliche Biomarker zur Überwachung von PDAC-Patienten nach Operationen und während anderer Behandlungen – das Kohlenhydratantigen 19-9 (CA19-9) – ist unspezifisch.

Die Forscher untersuchten 92 Proteine, die an der Entzündung, Entwicklung und Progression von PDAC beteiligt sind, von 701 Patienten mit PDAC im Stadium I–IV, 102 Patienten mit nichtmaligner Pankreaserkrankung und 180 gesunden Blutspendern. Die Forscher haben in allen Proben Plasma-CA19-9 gemessen.

Zwei Bioinformatiker arbeiteten unabhängig voneinander mit Regressionsmodellen und identifizierten zwei leistungsstarke Proteinpanels. Einer, Index I genannt, enthielt 9 Kandidatenproteinsignaturen plus CA19-9. Der andere, Index II, hatte 23 Proteine ​​und CA1-19. In beiden Indizes enthaltene Proteine ​​sind an Apoptose (CASP-8, FASLG und TRAIL), Immunsuppression (CCL20, CD4, IL10, MMP-7, MIC-A/B und PD-L2), Entzündungen (CRTAM, IL8, CXCL1, IL33, CD40L, IL1a, CSF-1, IL5 und IL12), Hypoxie (LAMP-3), Chemotaxis (MCP-3, CCL23 und CCL3) und Gefäßumbau (VEGFC).

Frühere Studien mit PDAC-Zelllinien oder Patienten haben festgestellt, dass einige dieser Proteine ​​mit der Krankheit assoziiert oder daran beteiligt sind. IL8 und IL10 sind bei Patienten mit PDAC erhöht und korrelieren sowohl miteinander als auch mit IL6, einem bekannten prognostischen Biomarker bei PDAC. IL8 ist ein proinflammatorisches Chemokin. Seine Expression wird durch verschiedene Zytokine, Hypoxie und reaktive Sauerstoffspezies stimuliert. Zu den aktivierten intrazellulären Signalwegen, die zur IL8-Expression führen, gehören NF-kB, PI3K-AKT und p38 MAPK. Sie sind auch als Downstream-Signalwege von aktiviertem KRAS bekannt, dem Onkogen, das in mehr als 90 % der PDAC-Tumoren aktiviert wird. Regulatorische T-Zellen in der Tumormikroumgebung sezernieren IL10 und tragen so zu einer lokalen immunsuppressiven Umgebung in PDAC-Tumoren bei.

Die Forscher fordern einen formellen prospektiven Test des klinischen Nutzens des Panels in der Anfangsphase der Diagnose neben der normalen diagnostischen Abklärung von Bauchspeicheldrüsenkrebs.

Eine aktuelle Studie kommt zu dem Schluss, dass glykiertes Hämoglobin (HbA1c) immer noch ein wichtiger Biomarker für mütterliche und neonatale Schwangerschaftsergebnisse bei Menschen mit Typ-1-Diabetes ist (Diabetes Care 2021;44:681-689).

HbA1c-Messungen spiegeln typischerweise die Glykämie der letzten 2–3 Monate wider, wodurch HbA1c für die wöchentliche oder zweiwöchentliche Überwachung von Typ-1-Diabetikern während der Schwangerschaft weniger geeignet ist. Mittlerweile hat sich gezeigt, dass eine HbA1c-Alternative, die kontinuierliche Glukoseüberwachung (CGM), die Ergebnisse bei Müttern und Neugeborenen verbessert, einschließlich einer erheblichen Reduzierung der Einweisungen in die Intensivstation für Neugeborene. Die Forschung hat auch neue Ansätze zur Überwachung des Blutzuckerspiegels aufgezeigt, darunter alternative Labormarker wie glykiertes CD59 (gCD59), 1,5-Anhydrogluticol (1,5-AG), Fructosamim und glykiertes Albumin.

Um Aufschluss darüber zu geben, welche Messwerte zu welchen Zeitpunkten die Schwangerschaftsergebnisse am besten vorhersagen können, untersuchten die Forscher, wie gut HbA1c-, CGM-Messwerte und alternative biochemische Marker für Typ-1-Diabetes Schwangerschaften erkennen, bei denen das Risiko eines suboptimalen Ergebnisses besteht. Die Forscher teilten Teilnehmerinnen, die schwanger waren oder eine Schwangerschaft planten, randomisiert Echtzeit-CGM mit CGM oder kapillarer Glukoseüberwachung allein zur Diabetesbehandlung zu. Frauen in der Gruppe zur Überwachung des Kapillarglukosespiegels hatten auch kurze Zeiträume mit maskierter CGM, um einen Vergleich der CGM-Messwerte zwischen den Gruppen zu ermöglichen.

Die Forscher überwachten Frauen für mindestens 24 Stunden auf Präeklampsie, Proteinurie, neonatale Hypoglykämie, die intravenöse Dextrose erforderte, und auf die Aufnahme auf die neonatologische Intensivstation.

Von den 225 Teilnehmern, die lebende Säuglinge zur Welt brachten, gaben 157 mindestens eine zusätzliche Probe für Labortests auf alternative Glykämiemarker ab, darunter Fructosamin, 1,5-AG, glykiertes Albumin und gCD59.

Die Forscher fanden heraus, dass HbA1c-, CGM-Messwerte und alternative Labormarker der Glykämie alle Schwangerschaften mit einem erhöhten Risiko für suboptimale Neugeborenenergebnisse identifizierten, selbst ab dem ersten Trimester. Allerdings lieferten weder Labormarker noch CGM-Messwerte eine zuverlässige Vorhersage des Schwangerschaftsausgangs. Marker und Metriken wiesen meist Flächen unter der Receiver Operating Characteristics Curve (AUROC) von 0,70 auf.

Alternative Labormarker steigerten den AUROC zur Vorhersage des Schwangerschaftsausgangs nicht nennenswert stärker als allgemein verfügbare HbA1c- oder CGM-Messwerte, wie z. B. die Zeit innerhalb und oberhalb des Zielglukosebereichs.